Transwell小室的介绍,24孔transwell加多少液体

1、Transwell小室的介绍

更准确地说，Transwell应该是1种实验技术，这项技术的主要材料是Transwell小室（Transwell chamber，Transwell insert），其外形为1个可放置在孔板里的小杯子，不同厂家对Transwell会有不同的命名，而不同型号也可有不同形状，不同大小，根据实验需要，可有不同选择。但无论是何种外形，其关键部分都是1致的，那就是杯子底层的1张有通透性的膜，而杯子其余部分的材料与普通的孔板是1样。这层膜带有微孔，孔径大小有0.1－12.0µm，根据不同需要可用不同材料，1般常用的。

2、24孔transwell加多少液体

24孔板下室1般加入600μl含20S的培养基。取细胞悬液100μl加入Transwell小室。

特别注意的是，下层培养液和小室间常会有气泡产生，1旦产生气泡，下层培养液的趋化作用就减弱甚至消失了，在种板的时候要特别留心，1旦出现气泡，要将小室提起，去除气泡，再将小室放进培养板。

培养细胞：

常规培养12-48h(主要依癌细胞侵袭能力而定）。24h较常见，时间点的选择除了要考虑到细胞细胞侵袭力外，处理因素对细胞数目的影响也不可忽视。

结果统计：

直接计数法，“贴壁”细胞计数，这里所谓的“贴壁”是指细胞穿过膜后，可。

3、transwell小室清洗方法

先用清水洗干净,然后用胰酶消化1小时,最后用75%的酒精浸泡过夜,使用前,在紫外灯下面照射1小时即可。

Transwell小室这项技术的主要材料是Transwell小室（Transwell chamber，Transwell insert），其外形为1个可放置在孔板里的小杯子，不同厂家对Transwell会有不同的命名，而不同型号也可有不同形状，不同大小，根据实验需要，可有不同选择。

使用方法：

将Transwell小室放入培养板中，小室内称上室，培养板内称下室，上室内盛装上层培养液，下室内盛装下层培养液，上下层。

4、transwell实验原理

transwell实验原理：

细胞迁移是肿瘤转移的1个重要指标，Transwell小室可研究肿瘤细胞的迁移能力。小室底层有1张通透性聚碳酸酯膜，上室为无血清培养基，下室为含10%胎牛血清培养基，细胞对血清中的细胞因子等具有趋向性，利用这种趋向性促使细胞向含血清的下室转移，不同细胞会显示不同的运动转移能力。

实验步骤：

1、消化细胞，制备无血清细胞悬浮液，计数，加入细胞悬液100ul，接种细胞105/孔。

2、24孔板（下室）加入600ul含10%胎牛血清培养基，将小室置于24孔板中，上室加100ul无血清培养基悬。