pcr跑胶位置条带偏大

pcr跑胶位置条带偏大



1、pcr跑胶位置条带偏大

pcr建议用上下游引物分别去测序,1个样品测两次总共花大概80块钱就可以搞定了。非目的条带的可能性比较大。凝胶电泳条带分析。PCR扩增后1般进行琼脂糖凝胶电泳分析,电泳后1般有以下几种条带:

1、引物带。引物浓度过高或是扩增效率不是特别高时都会有,1般不呈现为细带,为发散状;如果目的扩增产物带和引物带都很亮,可以考虑适当降低引物量。

2、引物2聚体带。比引物跑得慢1点,条带清晰,但如果扩增产物小于100bp时,产物与引物2聚体就不好分别了,建议采用DNA聚丙烯酰胺电泳(不是蛋白质的SDS聚丙烯酰胺电泳);如果引物2聚体在优化复性温度后仍然严重影响目的产物的扩增,优先考虑更换引物设计(因为引物合成的成本比反复优化条件的成本低)

3、目的扩增产物带。其大小与设计。

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