影响基因显微注射成功的主要因素有哪些？显微注射

1、影响基因显微注射成功的主要因素有哪些？

影响基因显微注射成功的主要因素有

1、影响显微注射成功的主要因素是外源DNA的浓度（1般为1ng/uL）

2、外源DNA的结构（线型分子的整合率较环型分子的高出5倍）

3、注射位点（雄性原核>雌性原核>细胞质）

4、动物品系（杂种动物的受精卵最佳）

5、注射的时期（1般为单细胞期）。

2、显微注射

显微注射就是借助光学显微镜的放大作用，利用显微操作仪，直接把DNA注射到动物早期胚胎、胚胎干细胞、体细胞中，然后生产动物个体的技术。

3、显微注射法生产转基因小鼠有哪些步骤？需要注意哪些问题？

目的基因的准备，公母鼠的准备，受精卵的获取和培养，显微操作，卵的移植。卵母细胞受精后出现雌原核和雄原核，应挑选大而清晰的原核，这样可避免显微注射时对核仁的损伤，这对显微注射的成功与否非常重要。显微注射时应控制注射量，注射量不足影响整合率，但注射剂量过多时，容易引起卵膜破裂。

4、细胞核移植常用的方法为什么是显微注射法？

显微注射法是指在显微镜下操作的微量注射技术。可将细胞的某1部分(如细胞核、细胞质或细胞器)或外源物质(如外源基因、DNA片段、信使核糖核酸、蛋白质等)通过玻璃毛细管拉成的细针，注射到细胞质或细胞核内。是研究各种生物分子的作用、制作转基因动物、克隆动物等的重要技术。优点：直接、相对容易控制。

5、显微注射

直接用显微注射器将重组DNA注射到哺乳动物细胞的细胞质或细胞核中的方法。是转基因动物技术中将基因导入哺乳动物细胞的主要方法之1。

6、什么是单精子卵细胞显微注射？

单精子卵细胞显微注射（ICSI）是使用显微操作技术将精子注射到卵细胞胞浆内，使卵子受精，体外培养到早期胚胎，再放回母体子宫内发育着床。