gus基因的检测方法？x gluc是什么东西？

1年前

1、gus基因的检测方法？

根据gus基因检测所用的底物不同，可以选择3种检测方法：组织化学法、分光光度法和荧光法（灵感度为分光光度检测法最高）。其中最为常用的是组织化学法。组织化学法检测以5-溴-4-氯-3-吲哚-β-葡萄糖苷酸（X-Gluc）作为反应底物，将被检材料用含有底物的缓冲液浸泡。若组织细胞发生了gus基因的转化，并表达出Gus，在适宜的条件下，该酶就可将X-Gluc水解生成蓝色产物。这是由其初始产物经氧化2聚作用形成的靛蓝染料，它使具Gus活性的部位或位点呈现蓝色，用肉眼或在显微镜下可看到，且在1定程度下根据染色深浅可反映出Gus活性。因此利用该方法可观察到外源基因在特定器官、组织，甚至单个细胞内的表达情况。

2、x gluc是什么东西？

检测大肠杆菌中uidA基因（β-葡萄糖苷酶基因β-glucuronidase, GUS）的底物。95%的大肠杆菌具有β-葡萄糖苷酶基因，用这种发色底物的培养基可以检测以及定量食品样本如肉、奶制品以及贝类中的大肠杆菌数量，以及在临床上检测尿路感染。国际上普遍采用该产品取代传统方法以精确检测饮用水中的大肠杆菌数量，该方法大大降低了假阳性和假阴性。该产品也用于快速检测植物中GUS基因融合标记。 β-葡糖醛酸酶（β-glucuronidase (GUS)）基因检测的显色底物。

3、X-Gluc为什么要避光？见光发生分解的产物是什么？

5-溴-4-氯-3-吲哚-β-D-葡萄糖苷

可能是吲哚开环和环之间的连接（聚合，就像DNA遇紫外光那样）。

4、gus染液是否有毒？

GUS染色液是β-葡萄糖苷酶基因染色试剂盒(β-Galactosidase Reporter Gene Staining Kit)的简称。GUS染色液染色原理是适宜的反应条件下，β-葡萄糖苷酶(GUS)可将X-Gluc水解成蓝色物质，该物质不溶解于转基因的细胞核组织中的靛蓝物质，具有GUS活性的部位或位点呈现蓝色或蓝色斑点，可用肉眼或显微镜观察到。GUS染色液可用于生物化学活性分析、免疫分析以及组织和细胞的组织化学染色，多用于转基因植物的GUS基因表达分析。该试剂仅用于科研领域，不适用于临床诊断或其他用途。GUS基因是存在于E.coli等1些细菌基因组内的编码β-葡萄糖苷酸酶的1种水解酶，该基因常作为融合标记用于植物转基因分析和调控研究中。

5、CAS号114162-64-0是什么化学药品？

CAS号114162-64-0的名称和物化性质如下：

中文名称 5-溴-4-氯-3-吲哚基-BETA-D-葡糖苷酸环己胺盐

中文别名 5-溴-4-氯-3-吲哚基-β-D-葡糖苷酸环己胺盐(X-GlcA);5-溴-4-氯-3-吲哚基-β-D-葡糖苷酸环己胺盐;5-溴-4-氯-3-吲哚基-β-D-葡萄糖苷酸环己铵盐;5-溴-4-氯-3-吲哚基-beta-D-葡糖苷酸环己胺盐;5-溴-4氯-3-吲哚葡萄糖苷(X-gluc);

英文名称 5-BROMO-4-CHLORO-3-INDOLYL B-D-

英文别名 X-GlcA,X-glucuronide CHA salt;5-Bromo-4-chloro-3-indolyl-beta-D-glucuronide cyclohexylammonium salt hydrate;5-BROMO-4-CHLORO-3-INDOLYLB-D-GLUCURONID E;5-Bromo-4-chloro-3-indolyl β-D-Glucopyranosiduronic Acid Cyclohexylammonium Salt;5-Bromo-4-chlo;X-GlcA CHA Salt;X-gluc/X-GlcA;X-Glu,CHA Salt;5-Bromo-4-chloro-3-indolyl Beta-D-glucuronide cyclohexylammonium salt;5-Bromo-4-chloro-3-indolyl β-D-Glucuronide Cyclohexylammonium Salt;5-BROMO-4-CHLORO-3-INDOLYL-B-D-GLUCURO-N IDE CYCLOHEXYLA.S.;X-Gluc CHA Salt;

外观性状白色固体

闪点 396.6ºC

蒸汽压 1.66E-22mmHg at 25°C

熔点 228-230ºC

沸点 732.2ºC at 760 mmHg

结构式：

。

6、gus染色原理？

β- D - 葡糖醛酸酶（GUS基因编码）是从大肠杆菌K- 12 菌株分离出的1种酸性水解酶，能催化许多β-葡萄糖苷酯类物质的水解。其中很多水解产物具有发色团或形成荧光物质，采用某种β-葡萄糖苷酶作底物，其反应产物可用分光光度，荧光和组织化学的方法检测。其中组织化学法是催化的底物是X-gluc，产物为蓝色化合物，该方法可观察到外源基因在特定器官，组织，甚至单个细胞内的表达情况。